L'enrichissement en dioxyde de carbone (CO2) est une technique avancée de culture indoor consistant à augmenter la concentration en CO2 de l'atmosphère de culture de 400 ppm (concentration ambiante) à 800-1500 ppm. Le CO2 est le substrat principal de la photosynthèse et sa supplémentation peut augmenter la production de biomasse de 20 à 40 % chez le chanvre CBD.
L'enrichissement en CO2 n'est bénéfique qu'en conditions de forte luminosité (>600 µmol/m²/s PPFD) et de température élevée (28-32°C), conditions qui saturent le cycle de Calvin sans CO2 supplémentaire. Les sources de CO2 incluent : bouteilles comprimées avec régulateur, générateurs de CO2 (combustion propane/gaz naturel) et champignons CO2 (Exhale bags). Au-delà de 1500 ppm, les bénéfices plafonnent et le CO2 devient toxique pour les humains (>5000 ppm). L'enrichissement CO2 augmente le coût de production mais améliore les taux de cannabinoïdes selon HortScience (Chandra et al., 2008).